Replikasyon orijini, DNA ikileşmesinin başladığı ilk bölgedir. Replikasyon orijini, DNA ikileşmesini tanıyan ve zinciri çözen bir protein olan pre-replikasyon kompleksini bağlar. Replikasyon orijininde DNA sarmalı açılır ve replikasyon çatalı oluşur. Replikasyon çatalı, yeni DNA ipliklerinin sentezlendiği bölgedir.
Replikasyon orijini sayısı ve konumu, prokaryotlarda ve ökaryotlarda farklıdır. Prokaryotlarda, DNA dairesel bir molekül olduğu için, sadece bir replikasyon orijini vardır ve ikileşme her iki yönde de ilerler. Ökaryotlarda ise, DNA lineer kromozomlar halinde bulunduğu için, birden fazla replikasyon orijini vardır ve ikileşme her kromozomda aynı anda başlar .