ATP hidrolizi, ATP molekülünün bir fosfat grubunu su ile reaksiyona sokarak ADP ve inorganik fosfat (P i) oluşturmasıdır. ATP hidrolizi, ATP’de depolanan kimyasal enerjiyi açığa çıkarır. Bu enerji, hücredeki çeşitli biyokimyasal reaksiyonlar için kullanılır. ATP hidrolizi, ATPaz enzimi tarafından katalize edilir. ATP hidrolizi, ATP, ADP ve P i’nin konsantrasyonlarına bağlı olarak farklı miktarda enerji salar. Standart koşullarda (ATP, ADP ve P i konsantrasyonları 1M, su konsantrasyonu 55 M), serbest enerji değişimi (Δ G) -28 ile -34 kJ/mol arasındadır.