Prob etiketleme yöntemleri, probların saptanmasını sağlayan yöntemlerdir. Problar, genellikle DNA veya RNA moleküllerinden oluşan ve belirli bir diziyi tanıyıp bağlanabilen kısa bir moleküldür. Problar, Southern blotlama gibi hibridizasyon yöntemlerinde spesifik bir DNA dizisini tespit etmek için kullanılır.
Prob etiketleme yöntemleri şunlardır:
-
Radyoaktif etiketleme: Problar, radyoaktif izotoplar (örneğin 32P, 35S, 3H) ile etiketlenir. Bu problar, otoradyografi ile görselleştirilebilir. Otoradyografi, radyoaktif probların zar üzerindeki DNA fragmanlarına bağlanmasından kaynaklanan radyasyonu algılayan bir röntgen filmi kullanır.
-
Radyoaktif olmayan etiketleme: Problar, radyoaktif olmayan işaretleyiciler (örneğin biyotin, digoksigenin, floresan boya) ile etiketlenir. Bu problar, kemilüminesan veya floresan yöntemlerle görselleştirilebilir. Kemilüminesan yöntemde, proba bağlı bir enzim (örneğin alkalin fosfataz) substratla reaksiyona girerek ışık üretir. Floresan yöntemde, proba bağlı bir floresan boya (örneğin FITC, Cy3) lazer ışığı ile uyarılarak floresans verir .
